分光光度计的核心部件包括光源、单色器、样品室(吸收池)、检测器和数据处理系统。
光源:提供宽谱带的光辐射,光源一般为钨灯和卤钨灯,提供340-2500nm波长光,一般用于可见光区,而氢灯和氘灯用于紫外区,提供150-400nm波长的紫外光。
单色器:通常置于吸收池的前面,可防止强光照射引起吸收池中物质分解,用于将光源发出的光分解为单色光,并允许特定波长的光通过,其性能直接影响射出光纯度,进而影响灵敏度、选择性和标准曲线的线性范围,一般通过棱镜或光栅等分光装置实现。
样品室:用于放置待测样品。当单色光通过样品时,部分光被样品吸收,剩余的光则透过样品进入检测器。一般分别用玻璃或石英,玻璃用于可见光,使用可用于紫外和可见光;切记:空白+试样吸收池要匹配,同厚度与通透性。
检测器:将光信号转换为电信号。转换后的电信号经过放大和处理,用于后续的测量和分析,内部可能包括光电池(硒光电池-可见光;硅光电池-紫外可见光)、光电管(紫敏光电管:铯阴极200-625nm;红敏光电管-银氧化铯阴极625-1000nm)、电倍增管(PMT)、多道二极管阵列检测器(DAD)。
数据处理系统:对检测器输出的电信号进行分析处理,最终得到样品的吸光度或透光度等参数。这些参数可以用于物质的定量和定性分析。
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